发布时间:2024-06-20 08:16:53 人气:642 来源:析浦科学仪器
很多同学都以为所有的GFP都是一种荧光蛋白,用荧光显微镜或者便携式GFP荧光手电筒观察GFP荧光是采用同一个通道或者同一个波段,结果观察荧光经常遇到无法看到GFP的表达,今天,析浦技术工程师给大家解释一下观察不到GFP荧光的原因:
下图为avGFP荧光蛋白的激发和发射光谱图:
由上图可以看出,avGFP绿色荧光蛋白的激发波长在350-410nm,激发波长(excitation:EX)的主峰在395nm,发射波长(emission :Em) 的主峰为509nm,所以,avGFP绿色荧光蛋白需要用紫外波段去激发,才能看到avGFP绿色荧光蛋白发出的509nm的绿色荧光。
下图为mGFP荧光蛋白的激发和发射光谱图:
由上图可以看出,mGFP绿色荧光蛋白的激发波长在450-505nm,激发波长(excitation:EX)的主峰在495nm,发射波长(emission :Em)的主峰为513nm,所以,mGFP绿色荧光蛋白需要用蓝光波段去激发,才能看到mGFP绿色荧光蛋白发出的513nm的绿色荧光。
尽管uVGFP和mGFP都是绿色荧光蛋白,但两种荧光蛋白的激发波长完全不一样,如果观察uVGFP的荧光,建议选用GFPfinder-2101UV 365nm荧光手电筒,如果观察mGFP的荧光,建议选用GFPfinder-2101RB 480nm荧光手电筒。如果您要观察荧光蛋白的表达,析浦科学仪器为终端客户提供GFP荧光手电筒样机免费试用。
上图:绿色荧光蛋白GFP在玉米种子上的表达
用GFPfinder-2101RB荧光手电筒观察GFP在小鼠上的表达