发布时间:2024-02-05 18:10:24 人气:444 来源:析浦(上海)科学仪器
DNA凝胶电泳(DNA Gel Electrophoresis)是一种通过一种称为琼脂糖凝胶来分离DNA片段的方法。琼脂糖凝胶来源于海藻多糖,形成小孔,能把不同大小的DNA分离。较小的DNA分子比大分子更快且更容易地通过孔。装载孔定向在凝胶的顶部,以允许将PCR产物插入凝胶中。施加电流以使带负电荷的DNA分子远离负电极(-)并朝向正电极(+)移动。DNA在凝胶中以单一的垂直通道迁移。有三个因素影响DNA分子的运动速度:电场的电压,琼脂糖的浓度,以及最重要的是,DNA分子的大小。
凝胶电泳可以通过大小来区分DNA。较大的DNA片段移动没有较小的DNA片段移动快,并且DNA片段的大小与迁移的距离之间存在非线性关系。使用DNA ladder(具有已知片段大小的样本)以确定实验中DNA条带的大小。
DNA本身在琼脂糖凝胶中是不可见的。因此,在进行DNA凝胶电泳实验时,需要将荧光染色剂添加到凝胶中,凝胶结合DNA,在紫外透射仪的照射下,会发出荧光,从而使实验人员看到DNA以明亮条带的形式出现在琼脂糖凝胶上。
凝胶电泳实验中的DNA染色主要有两种方法:
预染色(Pre-stain):DNA染色剂在熔化后加入琼脂糖凝胶混合物中,但在倒入凝胶之前。
后染色(Post-stain):凝胶电泳后,将凝胶在染色溶液中孵育。
下图:DNA凝胶电泳示意图
析浦紫外透射仪XEPU-1126系列专为DNA凝胶电泳实验设计,通过均匀高强度的紫外线透照,使DNA条带发出明亮的荧光,让实验人员可以轻松看胶、照胶、切胶!紫外光强度可自由调节,满足不同浓度样品的照射需求。
下图:析浦双波长紫外透射仪XEPU-1126ML,提供302nm中波紫外线和365nm长波紫外线,一键切换波长,满足不同实验需求。