发布时间:2023-12-25 13:13:00 人气:542 来源:析浦(上海)科学仪器
在凝胶电泳(gel electrophoresis)中,荧光核酸凝胶染色是用于DNA检测的染料。当与DNA分子结合并用紫外线或蓝光照射时,这些染料分子会发出明亮荧光。SYBR Safe DNA凝胶染料是一种高度敏感的染料,可在琼脂糖或丙烯酰胺凝胶中用于观察DNA,也适用于在凝胶中染色RNA。凝胶染色后,可使用紫外透射仪XEPU-1126或蓝光切胶仪XEPU-1126B激发凝胶染料,从而通过荧光表达清晰地看到DNA条带的位置、大小和定量。SYBR凝胶染料家族相比较溴化乙锭(EtBr)更安全,更敏感,是溴化乙锭(EtBr)的理想替代品。
SYBR Safe DNA凝胶染料的激发和发射光谱与SYBR Green I,Sybr Green II和SYBR Gold染料以及荧光素(FITC)非常相似。
SYBR Safe DNA凝胶染料的激发光峰值在280nm和502nm处,发射光峰值在530nm处。SYBR Safe染料与核酸结合后,可使用紫外透射仪XEPU-1126S(激发光:短波紫外线200-275nm)或蓝光切胶仪XEPU-1126B(激发光:蓝光470nm)照射,观察染色后的DNA。
注意:如果您打算使用DNA进行克隆,请避免将SYBR Safe DNA凝胶染料染色的DNA暴露于紫外线。
凝胶电泳完成后,从电泳室中取出凝胶和浇铸托盘。
打开紫外透射仪XEPU-1126S或蓝光切胶仪XEPU-1126B的盖板,将凝胶放到透射仪的滤色片上。
打开透射仪的开关。
析浦透射仪均配有无极调光功能,可以旋转旋钮自由调节激发光强度。
透过盖板观察,DNA应在深色背景上显示为亮绿色条带。拍照记录。
移除并处理凝胶,清洁透射仪的滤色片表面。
下图:用于激发SYBR Safe DNA凝胶染料的紫外透射仪XEPU-1126S(激发光:短波紫外线200-275nm)
下图:用于激发SYBR Safe DNA凝胶染料的蓝光切胶仪XEPU-1126B(激发光:蓝光470nm)
1)SYBR Safe DNA凝胶染料安全吗?
许多测试表面,SYBR Safe DNA凝胶染料几乎没有遗传毒性,没有急性毒性。
2)SYBR Safe DNA凝胶染料和SYBR Green I染料有什么区别?
所有SYBR凝胶染料具有相似的光谱特性,但具有不同的化学成分。SYBR Safe DNA凝胶染料专门开发的,用于替代溴化乙锭的更安全凝胶染料。SYBR Green I核酸凝胶染料是dsDNA的超敏染料,而SYBR Green II核酸凝胶染料是RNA和ssDNA的高度敏感染料。
3)蓝光和紫外都能激发SYBR Safe DNA凝胶染料,应该选哪种光源呢?
相比紫外线,蓝光对DNA样品造成的损害更小,同时蓝光对实验人员更安全。相较于用溴化乙锭染色DNA并搭配紫外透射仪,使用SYBR Safe进行DNA染色并搭配使用蓝光透射仪XEPU-1126B可使您提取出几乎没有紫外线引起的划痕或交联的DNA,从而大大提高克隆效率。如果您打算使用DNA进行克隆,请避免将SYBR Safe染色的DNA暴露于紫外线。
4)SYBR Safe DNA凝胶染料应该如何处理?
SYBR Safe DNA凝胶染料不属于危险废物,因此可以安全地丢弃在下水道或普通垃圾桶中,为废物处理提供便利并降低成本。