发布时间:2023-09-23 09:18:54 人气:408 来源:析浦(上海)科学仪器
SYBR Green是一种染色剂,可用于生物化学和分子生物学的多个领域,比如琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中核酸的荧光染色。SYBR Green在某些定量PCR方法中用作双链DNA定量的染料。SYBR Green还用于在凝胶电泳中观察和分析DNA。较高浓度的SYBR Green可用于对琼脂糖凝胶进行染色,以便更好地观察DNA。除了标记纯核酸外,SYBR Green还可用于标记细胞内的DNA,用于流式细胞术和荧光显微镜。在这些情况下,可能需要进行RNase处理以减少细胞中RNA的背景。
SYBR Green I是一种不对称花青染料,在分子生物学中常用作核酸染色剂。SYBR Green I 可以与DNA结合。所得DNA染料复合物能吸收497nm蓝光(λmax = 497nm)并发射绿光(λmax = 520nm)。SYBR Green I染色剂优先结合双链DNA,但对单链DNA的染色效果较低。
SYBR Green I是溴化乙锭(ethidium bromide,EB) 的理想替代品,因为SYBR Green I更安全,并且不存在溴化乙锭复杂的废物处理问题。在一项使用艾姆斯试验(测量化学品引起突变的能力)的研究中,在相同浓度下进行测定时,SYBR Green I 的致突变性比溴化乙锭低30倍。
在凝胶电泳实验中,用SYBR Green I进行DNA染色后,如何观察呢?因为SYBR Green I在蓝光激发后可发出明亮的绿色荧光,可以使用蓝光透射仪XEPU-1126B照射DNA样品进行观察。下图是SYBR Green染料在蓝光照射下发出绿色荧光的效果。
析浦蓝光透射仪XEPU-1126B采用24颗蓝光LED作为光源,照射均匀且光源寿命长。适用于多种核酸分子染料,例如荧光素, AttoPhos, GelStar, Vistra Green, SYPRO Orange, red-shifted GFP variants等。析浦蓝光透射仪即开即亮,从10%-99%自由调节蓝光强度,照射面积达21*26cm,可轻松观察荧光表达!
下图:析浦蓝光透射仪XEPU-1126B
Reference:
Singer VL; Lawlor TE; Yue S (February 1999). "Comparison of SYBR Green I nucleic acid gel stain mutagenicity and ethidium bromide mutagenicity in the Salmonella/mammalian microsome reverse mutation assay (Ames test)". Mutation Research. 439 (1): 37–47.