发布时间:2023-12-27 12:44:36 人气:1185 来源:析浦(上海)科学仪器
Superfolder GFP超折叠绿色荧光蛋白,简称sfGFP,是2005年发表的一种碱性(组成型荧光)绿色荧光蛋白。sfGFP来源于Aequorea victoria,分子量约为26.8kDa。sfGFP是一种非常快速成熟的弱二聚体。
绿色荧光蛋白GFP的现有变体在与其他蛋白融合表达时常常会错误折叠。然而,sfGFP超折叠绿色荧光蛋白,即使与折叠不良的多肽融合时也能很好地折叠。与“折叠报告基因“GFP(包含“cycle-3”突变和“增强型GFP”突变F64L和S65T的折叠增强型GFP)相比,sfGFP超折叠绿色荧光蛋白显示出改进的圆形排列耐受性、更强的化学变性耐受性以及改进的折叠动力学。
下图:sfGFP超折叠绿色荧光蛋白的结构
超折叠绿色荧光蛋白sfGFP和绿色荧光蛋白GFP的相同之处:
1)sfGFP和GFP都属于绿色荧光蛋白。
2)sfGFP超折叠绿色荧光蛋白和GFP绿色荧光蛋白的光谱特性相似。超折叠绿色荧光蛋白sfGFP的激发光波长是488nm,发射光波长是510nm。和GFP一样,sfGFP同样可以用488nm蓝光激发。
超折叠绿色荧光蛋白sfGFP和绿色荧光蛋白GFP的不同之处:
1)sfGFP超折叠绿色荧光蛋白相比GFP绿色荧光蛋白,更易溶解,折叠更快,是已知的GFP突变体中最亮的。
2)sfGFP超折叠绿色荧光蛋白即使与折叠不良的多肽融合时也能很好地折叠。
3)sfGFP超折叠绿色荧光蛋白相比GFP绿色荧光蛋白,对化学变性剂和极端温度有更大的耐受力。
下图:超折叠绿色荧光蛋白sfGFP的激发光和发射光波长
荧光手电筒GFPfinder-2101系列可选488nm的激发光,照射均匀且照度稳定。4颗LED提供大面积且高强度的蓝光照射,非常适合激发观察各种绿色荧光蛋白,包括sfGFP、GFP、eGFP等。
使用荧光手电筒GFPfinder-2101激发sfGFP和GFP的方法:打开荧光手电筒GFPfinder-2101,照射含sfGFP或GFP的样本,戴上配套的黄色荧光观察镜,可直接观测荧光。尽量在环境光线暗的地方观察,荧光效果更明显。
下图:荧光手电筒GFPfinder-2101RB,套装包含一个荧光手电筒,一副荧光观察镜,一个拍照滤镜
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