发布时间:2024-09-27 12:48:47 人气:526 来源:析浦(上海)科学仪器
摘要:DsRed2是在珊瑚盘藻中发现的一种红色荧光蛋白,激发光波长561nm,发射光波长587nm。红色荧光蛋白DsRed2是一种理想的可视化报告基因,为转基因愈伤组织提供了一种早期筛选工具。红色荧光不仅可以在愈伤组织和体细胞胚中检测到,而且可以在成熟植物的大多数组织和器官中检测到。DsRed2的光谱特性与绿色荧光蛋白GFP有明显不同,消光系数和荧光量子产率更高。
在植物生物技术中,遗传转化是研究基因功能和改善植物在不同胁迫下表现的有力工具。荧光蛋白作为报告基因,长期以来已被广泛应用于许多植物和作物的遗传转化研究。绿色荧光蛋白GFP是广泛使用的转基因报告基因之一,GFP使用简单,无需额外的蛋白质、底物或辅因子即可测量荧光。
DsRed2是在珊瑚盘藻中发现的一种红色荧光蛋白,DsRed2的光谱特性与绿色荧光蛋白GFP有明显不同,消光系数和荧光量子产率更高。红色荧光蛋白DsRed2是一种理想的可视化报告基因,为转基因愈伤组织提供了一种早期筛选工具。红色荧光不仅可以在愈伤组织和体细胞胚中检测到,而且可以在成熟植物的大多数组织和器官中检测到。红色荧光蛋白DsRed主要用于动物成像,在植物中成功报道DsRed红色荧光蛋白是在转基因烟草中,其瞬时表达和稳定转化并未对植物发育和形态发生产生不利影响。从那时起,红色荧光蛋白DsRed就被用于多种植物转基因研究,例如大豆、水稻和核桃。因此,红色荧光蛋白DsRed可能成为植物生物技术和分子育种更好的替代报告标记。
华中农大于2018年在The Crop Journal发表的一篇文献中,将红色荧光蛋白DsRed2作为可视化报告基因应用于棉花遗传转化,以研究其作为棉花生物技术和分子育种报告标记的能力。在转基因棉花植株体细胞胚胎发生的不同阶段以及几乎所有器官和组织中都检测到了红色荧光蛋白DsRed2的表达。为了确定红色荧光蛋白DsRed2基因是否能在不同的遗传背景下表达,将转基因植株与四个不同的品种杂交。分析了35S启动子上的DNA甲基化,以找出红色荧光蛋白DsRed2表达水平与35S启动子上DNA甲基化之间的关联。该研究表明红色荧光蛋白DsRed2可能成为棉花遗传转化和分子育种计划的有用工具。
下图是红色荧光蛋白DsRed2的激发发射光谱图。DsRed2激发光波长561nm,发射光波长587nm,可以用红色荧光蛋白手电筒GFPfinder-2101GR,激发烟草、拟南芥等各种动植物中的DsRed2发出红色荧光。
红色荧光蛋白手电筒GFPfinder-2101GR可以激发DsRed, tdTomato, mCherry等多种红色荧光蛋白,适用各种材料,如植物(水稻、小⻨、玉米、大豆、棉花、拟南芥)、动物(斑⻢⻥、小鼠)、微生物和愈伤组织等。
红色荧光蛋白手电筒GFPfinder-2101GR相较于传统方法,有以下优势:
GFPfinder-2101GR可替代荧光显微镜,进行大批量荧光筛选。肉眼直接观察荧光,长时间筛选不费眼。
可在田间或大棚里进行活体植物筛选,无需采摘叶片。
价格仅为荧光显微镜的十分之一。
光源寿命长达5万小时,使用数年免维护。
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