绿色荧光蛋白GFP作为植物中的重要报告基因

绿色荧光蛋白GFP在植物中的应用

绿色荧光蛋白（green fluorescent protein, GFP）可作为多种活植物细胞和转基因植物中的报告基因。GFP因其多功能且灵敏的特性，正越来越多地应用于植物生物学中。应用于细胞上时，GFP被用作体内报告基因来评估瞬时和稳定转化的频率。GFP也被证明是监测蛋白质运输和亚细胞定位的理想工具。具有更强大折叠特性的更明亮的GFP突变体的开发使得整个叶子和植物中的GFP能够更好地宏观可视化。一个有趣的例子是使用GFP来监测病毒在整个植物内部和植物之间的移动。GFP也正在成为监测转基因运动和田间转基因植物的强大工具。GFP是一个真正可用于整个植物的体内报告系统。随着更多GFP基因变体的出现，GFP的用途将进一步增加。

有研究表明，重新设计的GFP基因序列与高表达的人类蛋白质的密码子相比，在玉米叶细胞中的GFP表达量比原始水母GFP序列高20倍。当与生色团突变相结合时，新的GFP序列在490nm蓝光激发下可产生100倍以上的明亮荧光信号，并且生色团形成速度更快。不需要外源底物、辅因子或其他基因产物。GFP在植物细胞中非常稳定，几乎没有光漂白现象。基于GFP的荧光激活细胞分选后即可获得活细胞。

这种修饰的GFP在各种瞬时表达系统中具有广泛的用途，并且可以轻松检测弱启动子活性，可视化靶向细胞核和各种质体的蛋白质，分析活体单细胞和体内的信号转导途径，以及高等植物转基因活细胞和组织中的许多其他应用。GFP作为新的报告基因可用于监测高等植物中的基因表达、信号转导、共转染、转化、蛋白质运输和定位、蛋白质-蛋白质相互作用、细胞分离和纯化以及细胞谱系。

检测绿色荧光蛋白GFP的荧光表达

绿色荧光蛋白GFP在特定波长的光线（通常是蓝光440-460nm或紫外光365nm）激发下，会发出明亮荧光。

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