异硫氰酸荧光素FITC的激发和发射波长

异硫氰酸荧光素FITC

异硫氰酸荧光素 (fluorescein isothiocyanate)，简称FITC。异硫氰酸荧光素FITC是由荧光素核和胺反应性异硫氰酸酯部分组成的荧光素衍生物。异硫氰酸酯基团与伯胺反应，形成共价硫脲键，将荧光素连接到生物分子上。异硫氰酸荧光素FITC通常以由5-异硫氰酸荧光素（5-FITC）和6-异硫氰酸荧光荧光素（6-FITC）组成的异构体的混合物的形式提供。

异硫氰酸荧光素FITC不能渗透细胞。当与活细胞孵育时，FITC将与暴露于细胞外基质的膜蛋白上的任何游离胺基结合，从而产生具有微弱荧光膜的活细胞。

异硫氰酸荧光素FITC对温度和pH都很敏感。有实验表明，异硫氰酸荧光素FITC标记的缀合物的荧光信号强度随着环境变得更酸性而降低。例如，当pH从10降低到3时，FITC-葡聚糖的强度降低了95%以上。另一方面，温度影响FITC的稳定性。在升高的温度下，FITC是非常不稳定的，并且用FITC产生的缀合物对荧光素标记物的水解敏感。

异硫氰酸荧光素FITC的应用

异硫氰酸荧光素FITC是在制备与生物分子偶联物中，最广泛使用的荧光探针。异硫氰酸荧光素FITC广泛应用于绿色荧光染料荧光素标记蛋白质、抗体、肽、激素、胺修饰的寡核苷酸和其他含胺分子。FITC上的异硫氰酸酯部分（-N=C=S）与目标生物分子上的氨基末端和伯胺基团反应，形成共价硫脲键。所得到的荧光素缀合物可在多种应用中用作特异性探针，包括酶动力学、免疫细胞化学、免疫组织化学、荧光显微镜、流式细胞术和荧光原位杂交。

异硫氰酸荧光素FITC激发发射波长

异硫氰酸荧光素FITC激发光峰值491nm，发射光峰值516nm。可使用蓝光手电筒GFPfinder-2101RB激发异硫氰酸荧光素FITC发出荧光。

下图：异硫氰酸荧光素FITC的激发波长和发射波长

下图：用于激发异硫氰酸荧光素FITC的荧光手电筒GFPfinder-2101RB

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