紫外交联仪的原理和应用

在核酸实验中紫外交联仪常用于烘烤，其效率比传统的烘烤法高出5-10倍，也是不可缺少的实验器材，下面将为您详细介绍紫外交联仪。

紫外交联仪简介

由于紫外交联仪配置了一种紫外能量程序设计系统（Joules/c㎡）,即其中的时间积分仪连续检测紫外光的照射。紫外交联试验主要用来筛选特性蛋白，主要应用于生物学等领域。

紫外交联仪工作原理

以聚烯烃为主要原料掺入适量的光引发剂，用紫外光照射，通过光引发剂吸收特定波长的紫外光引发产生聚烯烃自由基，从而发生一系列快速聚合反应，生成具有三维网状结构的交联聚烯烃。

紫外交联仪的应用

紫外交联仪是一种多用途的254mn紫外辐射系统，主要用于将核酸交联于膜上。还可用于琼脂糖凝胶中DNA的切割、RecA突变筛选、嘧啶二聚体产生的部分限制性内切酶消化、UV灭菌消除PCR污染等。在紫外灭菌、聚合物紫外处理等方面也有应用。创建卵裂抑制胸腺嘧啶二聚体的基因定位，测试RecA的功能

紫外交联仪特点

1）硬件特点

1. 可触摸键盘。

2. 汉化液晶屏显示。

3. 大型不锈钢紫外曝光室。

2）软件特点

1. 关机信息不丢失。

2. 具有曝光能量手动设置功能。

3. 具有曝光时间手动设置功能。

4. 紫外交联仪具有能量吸收值达到设定值时，照射将自动停止功能。

5. 紫外光源强弱与否、时间差异与否，照射循环均都有很好的重复性。

6. 紫外照射可使杂交信号比传统烘烤法提高5-10倍。

紫外交联仪操作说明

1.开启前

将紫外交联仪设备水平放在工作台上。

在开门时确保有足够的空间

2.操作步骤

插入电源线的母头到交联剂。

插头插入正确接地的电源插座中。（交联剂的正确的工作电压是产品信息的标签上找到）。

打开ON / OFF开关到ON的位置。

预设能量和时间：按PRESET（预调设置）→ENERGY（能量），输入所需的能量级，再按ENTER（进入）即完成能量设定；按PRESET（预调设置）→TIME（时间），输入所需的时间，再按ENTER（进入）即完成时间设定。按PRESET（预调设置）→wavelength（波长）再按ENTER（进入）即完成波长设定。注：每次设定波长之前要换上相应的号灯管。然后按START键开始工作。

紫外交联仪日常使用时条件

1.环境温度：5-35℃

2.相对湿度：≤80%

3.经常用软布或海绵清洁内室

4.保持紫外曝光室内干燥清洁。

5.搬运时包装应由防尘、减震物品、纸箱由里到外顺序组成。

6.运输过程中防止冲击、剧烈震动、潮湿。

7.更换不同波长的灯管及使用的灯管损坏时，需要更换灯管。更换方法：把灯管向下拉出灯架，再将灯管两端的插脚从软连接插座中拔出；将新管装入软连接插座，再将灯管向上轻轻的推入灯架，更换完毕。

紫外交联仪使用注意事项

1.不能在内室表面残留化学试剂；

2.绝不能使用清洁器清理内室；

绝不能使用丙酮或**清洁内室。

更换保险丝时一定要先断掉仪器电源，打开保险丝管座的盖，更换相应容量的保险丝，再盖紧。

如何正确理解紫外交联仪中三种波长UVA(365)、UVB(302)、UVC(254)

紫外线是指通过棱镜将自然光分成赤、橙、黄、绿、青、蓝、紫七色光,波长较紫色光更短的一类光线的总称．它广泛存在于自然界中,与人的生活密切相关。根据生物效应的不同, 将紫外线按照波长划分为四个部分:A波段(UVA),又称为黑斑效应紫外线(400～315nm);B 波段(UVB ) , 又称为红斑效应紫外线( 3 15～280nm);C 波段(UVC),又称为灭菌紫外线(280～100nm);D 波段(UVD),又称为真空紫外线(Vacuume UV)(200～10nm)。

析浦科学仪器相关紫外产品，很多年之前，紫外线就已被用于防止物体表面微生物的生长，空气中微生物的破坏以及液体灭菌，紫外线杀菌消毒技术具有广谱高效、无二次污染、不存在抗药性、便于管理和实现自动化等诸多优点，多年来被广泛运用于物体表面、空气、饮用水的消毒和废水处理。以C 波段为主紫外线可以杀灭包括细菌繁殖体、芽胞、分支杆菌、病毒、真菌、立克次体和支原体等各种微生物。杀菌效果是由微生物所接受的紫外线辐照剂量决定的，不同种类的微生物对紫外线的敏感性不同，因此使用紫外线消毒时，必须确定合适的辐照剂量以达到灭杀目标微生物的效果。少了杀灭效率低，高了造成灯的不应有冗余。如今紫外线杀菌也应用到了手术室，开始对空气进行消毒杀菌，上述应用都应用到了人们的日常生活中。科研工作者不断的研究与深入，慢慢将紫外线杀菌的这种特性应用到生命科学的研究中。目前析浦科学仪器有限公司，使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三种波长制造了三款紫外交联仪，主要包括xepu-1208A（365nm）、xepu-1208B（302nm）、xepu-1208C（254nm）满足不同的科研需求。如今基因组学蛋白组学走在时代的前沿，分子生物学相关技术得到了质的飞跃，离不开人们对未知科学的探索，在分子水平上，在紫外线照射下，核酸链中相邻的嘧啶可发生二聚化，主要发生在胸腺嘧啶碱基之间。 近一百年来，研究人员一直利用紫外线的这种特性作为研究基因突变的工具。总而言之，这些发现为分子生物学和细胞生物学以及其它领域中基于紫外线的应用铺平了道路。

紫外交联仪在生命科学领域的应用

紫外交联仪是一种多用途的紫外辐射系统，主要用于将DNA或RNA交联到尼龙膜、硝酸纤维素膜上。交联过程仅需25–50秒。传统的方法是将膜置于真空烘箱中80℃烘烤2小时。与真空烘箱烘焙相比，紫外交联仪照射可使杂交信号显著增加。此外XEPU系列紫外交联仪可用于Northern、Southern blotting、EMSA等膜交联，CLIP-seq、iCLIP-seq、PAR-CLIP-seq、pBpa、sulfo-SDA、psoralen等双分子交联以及微生物灭活（例如细菌，真菌，病毒），光稳定性验证，琼脂凝胶中DNA的切割，RecA突变筛选，胸腺二聚体产生的部分限制性内切酶消化，UV灭菌消除PCR污染。在紫外灭菌，聚合物固化（例如水凝胶，甲基丙烯酸甲酯树脂）等方面也有应用。目前析浦科学仪器XEPU系列四款紫外交联仪，xepu-1208A（365nm）、xepu-1208B（302nm）、xepu-1208C（254nm）在功能上有着诸多的优势与特点，比如：

◇多种模式自由选择：自动模式（Auto Mode）、能量模式（Energy Mode）、时间模式（Time Mode）、预设模式（Preset Mode）。

◇多种光源自由选择：254nm(UVC）、302nm（UVB）、365nm（UVA)

◇安全性强：仪器装有安全联锁装置，当门打开或者门关闭不严时会自动关闭紫外光源，保护使用者安全。

◇灯管更换提示功能：当灯管功率小于初始值的60%时，此灯亮，提示用户需要更换灯管。

◇光源分布一致性好：紫外交联仪光源的分布，尤其是中心区域的分布一致性好，能够保证样品各点吸收的能量基本一致。

◇友好、安全的观察窗：观察窗采用3层特殊玻璃，用户可以安全地通过此窗口观察样品和灯的运行状态。

◇ 预设常用实验程序

◇ 不同波长灯管自动识别功能

EMSA实验

凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

紫外线诱导的突变

为明确紫外线对大豆疫霉菌的诱导突变作用‚研究了紫外线诱变的突变菌株的菌落形态、菌丝生长速率、菌丝形态、卵孢子形态、产孢能力、同宗配合能力、致病力和抗药性的变异情况。结果表明‚大豆疫霉菌突变菌株菌落形态、菌丝生长速率、菌丝和卵孢子形态以及同宗配合能力都发生显著变异‚游动孢子产孢量和致病性明显降低。